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Southern Blotting
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非放射性Dig-dUTP
非放射性Dig-dUTP...
作者:发表于:2008-01-03 04:45:27 点击:75 评论:0 查阅全文...
analysis of genomic DNA by southern blotting
Reagent Final Conc. Volume Mass Salmon Testes DNA (Sigma D-9156), 10.4 mg/ml, boil 5 min. before use optional: dextrane sulfate dH 2 O ad 20 ml (1 hour) Isolate 1-10 g target cDNA from vector with restriction digestion, agarose gel electrophoresis,...
作者:发表于:2007-06-19 12:47:10 点击:92 评论:0 查阅全文...
基因组DNA Southern杂交
1 )基因组 DNA Southern 印迹的制备 预备 1. 用适当的限制性内切酶消化基因组 DNA 样品( 10 g )。 2. 进行琼脂糖凝胶电泳。一般用 0.7 ~ 1.0 %的琼脂糖凝胶分离基因组 DNA ,它在 1 ~ 15kb 的范围内有较好的分辨率,可选用 TBE 或 TAE 缓冲液。琼脂糖凝胶电泳...
作者:发表于:2007-07-19 12:46:08 点击:174 评论:0 查阅全文...
Southern印迹技术
实验原理 : Southern印迹是将DNA片断从电泳凝胶上直接转移至膜支持物(如硝酸纤维素膜、尼龙膜)上,使DNA片断固定的技术。先将DNA经限制性内切酶消化成一系列片段,进行琼脂糖凝胶电泳,各片段因分子量不同而彼此分开,然后经碱处理凝胶,使DNA的片段被变性、中和并通...
作者:发表于:2007-04-19 12:44:11 点击:196 评论:0 查阅全文...
Southern blot实验方法与步骤
用于检测重组DNA,也可分析DNA样品中是否有与探针序列同源的DNA片段。用于基因诊断,也可验证检测片段的分子量大...
作者:发表于:2007-03-19 12:43:17 点击:554 评论:0 查阅全文...
Southern 杂交
Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该...
作者:发表于:2006-02-19 12:41:59 点击:231 评论:0 查阅全文...
Southern 杂交鉴定
1)取10ul待测DNA,于一定浓度的琼脂糖凝胶上进行电泳。(20mL,1.0%凝胶,) 2) 凝胶用溴化乙锭染色,切掉凝胶四周多余部分,并在凝胶的一角作一记号, 拍照 记录电泳结果(拍照时, 凝胶旁放一尺子)。 3) 杂交用胶的制备 (做以下步骤两组合一) A.将凝胶浸没入30mL 0.25mol/...
作者:发表于:2006-08-19 12:40:41 点击:120 评论:0 查阅全文...
Southern 杂交一般操作
一 基因组酶切和电泳 在200 l 微量离心管中加入: 25 l DNA样品(约10g), 3l 限制性内切酶(MBI,10 U/ l) 5 l 相应的10buffer, 补水到50l。 然后加一滴矿物油覆盖, 稍微离心后放于37℃水浴8-12小时。酶切完后,取5l 酶切DNA样品于0.8%的琼脂糖凝胶上检测酶是否充分...
作者:发表于:2006-08-19 12:39:46 点击:147 评论:0 查阅全文...