- 外源DNA和质粒载体的连接反应
- 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。...
- 作者:发表于:2006-08-17 13:54:57 点击:224 评论:0 查阅全文...
- 重组质粒的连接、转化及筛选
- 重组质粒的连接、转化及筛选...
- 作者:发表于:2006-08-17 13:54:08 点击:223 评论:0 查阅全文...
- 用氯化钙制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
- 下面的简单方案是Clhen等(1972)所用方法的变通方案,常用于成批制备感受态细菌,这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生5x106-2x107个转化菌落,这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要。...
- 作者:发表于:2006-08-17 13:51:43 点击:200 评论:0 查阅全文...
- How to Make Competent Cells
- Step 1: Take an 100 mL aliquot of frozen cells from the -80 o C and innoculate about 500 ml to 1 L sterile LB broth. DO NOT ADD antibiotic, since these cells do not have an plasmid in them. Work as sterile as possible. Step 2: Grow the cells on a sh...
- 作者:发表于:2006-08-17 13:48:51 点击:61 评论:0 查阅全文...
- Screening of recombinants
- It is best to do a test ligation without insert, if the background is low, it would not be necessary to screen colonies for insert....
- 作者:发表于:2006-08-17 13:47:44 点击:58 评论:0 查阅全文...


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