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考马斯亮蓝染色中G250与R250的区别

  

R250属于慢染,脱色脱的完全,G250属于快染,脱色脱的不彻底

R250(Coomassie brilliant blue R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax=560―590nm.染色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色.但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点.


G250, 又名Xylene brilliant cyaninG.比考马斯亮蓝R250多二个甲基.MW=854;λmax=590―610nm.染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析.

G250中的G就是Green,偏绿,R250中的R代表Red,偏红,在进行小分子量蛋白的Tricine电泳是常用G250染色,至于加热,染和脱色都可以加热,但都是在急需知道结果的情况下采用,加热后染的背景色很重脱色时间就长而且很难将背景色脱干净,脱色液经常加热会导致固定剂的会发,很快脱色剂就没用了,脱色效果很差,而且加热挥发出来的甲醛对呼吸道有刺激作用因此尽量不要加热!

Coomassie G (green)-250 is greenish, stains bright blue, is less soluble and used in colloidal form (stain enters a protein better than the acrylamide, so background is minimized). Coomassie R (red)-250 dye is reddish, stains dark blue and is more soluble, usually resulting in high background.

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染色 考马斯亮蓝
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